篇1：重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究Ⅳ.与IDEXX ELI
重组N蛋白抗原检测PRRSV抗体ELISA的研究Ⅳ.与IDEXX ELISA试剂盒及Western blot的比较
利用重组N蛋白抗原建立了检测猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)抗体的ELISA方法并组装成试剂盒,将试制的3批试剂盒分别与IDEXX生产的`试剂盒及Western-blot进行了符合率试验.试验结果表明,所研制的试剂盒与Western blot的符合率达97.67%以上.对460份临床血清分别用自制的试剂盒和IDEXX公司生产的试剂盒进行检测,其中有37份不相符合,用Western blot对这37份血清进行验证,有35份血清检测结果与自制的试剂盒检测结果一致.由此表明,自行研制的试剂盒,其特异性和敏感性均能满足目前临床上该疫病的流行病学分析或免疫抗体检测.
作 者：吴延功 徐天刚 王志亮 张喜悦 王君玮 宋翠平刘佩兰 徐培莲 宋芳 WU Yan-gong XU Tian-gang WANG Zhi-liang ZHANG Xi-yue WANG Jun-wei SONG Cui-ping LIU Pei-lan XU Pei-lian SONG Fang 刊 名：中国兽医学报 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF VETERINARY SCIENCE 年，卷(期)： 26(6) 分类号：S852.65 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒 ELISA 试剂盒 Western blot篇2：猪传染性胃肠炎病毒重组N蛋白抗原间接ELISA抗体检测方法的建立
猪传染性胃肠炎病毒重组N蛋白抗原间接ELISA抗体检测方法的建立
本研究以纯化的原核表达猪传染性胃肠炎病毒N蛋白为诊断抗原,建立了猪传染性胃肠炎病毒抗体检测的`间接ELISA诊断方法,将其命名为rnTGE-ELISA.该抗原不与其他常见10种猪病的阳性血清发生交叉反应,批内和批间重复性试验的变异系数均小于15%;对仔猪免疫后不同时间的血清检测结果表明rnTGE-ELISA与纯化病毒ELISA符合率达95.0%;rnTGE-ELISA相对于VN试验的敏感性为96.3%、特异性为92.2%;现地试验中,rnTGE-ELISA与Svanova TGEV/PRCV antibody diagnosis Kit的符合率达87.0%,通过中和试验复核结果表明,rnTGE-ELISA的假阳性低于Svanova TGEV/PRCV antibody diagnosis Kit.本试验建立的rnTGE-ELISA诊断方法具有良好的敏感性和特异性,为免疫猪群抗体监测和TGE流行病学调查提供了一种快速、简便的血清学诊断方法.
作 者：孙东波 冯力 时洪艳 刘胜旺 陈洪岩 佟有恩 李伟杰 王明 马思奇 陈建飞 SUN Dong-bo FENG Li SHI Hong-yan LIU Sheng-wang CHEN Hong-yan TONG You-en LI Wei-jie WANG Ming MA Si-qi CHEN Jian-fei Dong-bo,FENG Li,SHI Hong-yan,LIU Sheng-wang,WANG Ming,MA Si-qi,CHEN Jian-fei(中国农业科学院哈尔滨兽医研究所,兽医生物技术国家重点实验室,黑龙江,哈尔滨,150001)陈洪岩,佟有恩,李伟杰,CHEN Hong-yan,TONG You-en,LI Wei-jie(哈尔滨维科生物技术开发公司,黑龙江,哈尔滨,150001)
刊 名：中国预防兽医学报 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE 年，卷(期)：2006 28(5) 分类号：S852.65+9.6 关键词：TGEV 重组N蛋白 间接ELISA 诊断篇3：串联表达PRRSV M与GP5蛋白重组腺病毒的构建及其免疫特性研究
串联表达PRRSV M与GP5蛋白重组腺病毒的构建及其免疫特性研究
利用PCR扩增出猪繁殖与呼吸综合征病毒的M基因,按正确的.读码框与GP5基因串联,成功构建穿梭载体pShuttle-CMV-M-GP5,经PCR、测序鉴定正确.Pme Ⅰ线性化后在BJ5183大肠杆菌内与腺病毒骨架载体pAdEasy-1同源重组,产生重组腺病毒DNA.重组腺病毒DNA经Pac Ⅰ线性化后用脂质体转染HEK-293A细胞,在细胞内包装成完整的腺病毒,通过IFA可以检测到M与GP5串联的重组腺病毒构建成功,可以正确地表达目的蛋白.将构建好的重组腺病毒免疫小鼠,结果表明可以诱导产生较强的体液免疫应答(ELISA抗体和中和抗体)和细胞免疫应答(淋巴细胞增殖和CTL反应).证明该重组腺病毒具有较好的免疫原性,为下一步猪体免疫试验奠定了基础.
作 者：蒋文明 姜平李玉峰 汤景元 王先炜 杜以军 JIANG Wen-Ming JIANG Ping LI Yu-Feng TANG Jing-Yuan WANG Xian-Wei DU Yi-Jun 刊 名：生物工程学报 ISTIC PKU英文刊名：CHINESE JOURNAL OF BIOTECHNOLOGY 年，卷(期)：2006 22(4) 分类号：Q786 关键词：PRRSV M GP5 重组腺病毒 体液免疫 细胞免疫