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一种利拉鲁肽中间体多肽的制备方法

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(19)中华人民共和国国家知识产权局

(12)发明专利申请

(21)申请号 CN201810119330.0 (22)申请日 2018.02.06

(71)申请人 美药星(南京)制药有限公司

地址 210038 江苏省南京市经济技术开发区兴和路5号

(10)申请公布号 CN108191981A

(43)申请公布日 2018.06.22

(72)发明人 潘尚书;汤传根;李宬;刘晓锐;崔怀言;陈松;张昊宁 (74)专利代理机构

代理人

(51)Int.CI

权利要求说明书 说明书 幅图

(54)发明名称

一种利拉鲁肽中间体多肽的制备方法

(57)摘要

本发明属于多肽制备方法技术领域,特别

涉及一种利拉鲁肽中间体多肽GLP‑1(7‑37)的制备方法。其主要步骤包括构建重组利拉鲁肽工程菌,通过大肠杆菌诱导以包涵体形式表达利拉鲁肽中间体融合蛋白,再经过变性、复性、酶切和分离纯化得到利拉鲁肽中间体多肽GLP‑1(7‑37)。此发明通过改变重组序列信号肽,表达方式变为胞内不溶性包涵体表达,表达量大大增加;洗涤后的包涵体采用碱溶,无需使用大量的变性剂,

以蛋白浓度为20‑30g/L的高浓度加入包涵体溶解缓冲液,变复性时间不超过1h,溶解后既可以酶切;减少了工序,缩小操作体积,降低试剂成本,利于工业化放大;采用UniSP‑50XS阳离子交换分离纯化,分离度高。本发明制备的利拉鲁肽中间体多肽纯度达到87%以上,收率大于85%。

法律状态

法律状态公告日

2018-06-22 2018-06-22 2018-07-17

法律状态信息

公开 公开

实质审查的生效

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公开 公开

实质审查的生效

权利要求说明书

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说明书

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